Métodos de pesquisa de agentes microbianos de água, solo, ar

Data:

2018-09-11 04:50:19

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Microorganismos – os menores, principalmente de seres unicelulares, amplamente difundidos na natureza. Eles são encontrados em todos os ambientes (ar, solo, água), em seres humanos e animais, nas plantas. agentes microbianos métodos de investigação

De Qualidade, a variedade e o número de microrganismos dependem, principalmente, dos nutrientes de conexões. No entanto, grande importância tem também a umidade, temperatura, aeração, a ação de raios solares e outros fatores.

Métodos sanitária e microbiológica de pesquisa ambientes naturais, permitem identificar a presença de patógenos, para determinar a sua quantidade e, de acordo com os resultados obtidos, elaborar medidas para a resolução ou prevenção de doenças infecciosas. Além disso, o quantitativo de contabilidade é essencial para a modelagem de ecossistemas e desenvolvimento de princípios de gestão de processos naturais. Considere o seguinte, o que são Métodos microbiológicos de pesquisa.

O Solo

Ele é considerado pelos estudiosos como um dos possíveis caminhos de transmissão de patologias infecciosas. Com secreções de pessoas doentes ou animais no solo penetram patógenos. Alguns deles, em particular, споровые, são capazes de persistir no solo longo período de tempo (por vezes, algumas dezenas de anos). No solo caem agentes perigosos, tais infecções, como o tétano, anthrax, botulismo e пр. Métodos sanitária e microbiológica estudo do solo permitem identificar "o microbiano, número (contagem de microrganismos em um grama de solo), bem como se o índice (número intestinais palitos).

A Análise do solo: noções básicas

Métodos de pesquisa microbiológica do solo deve em primeiro lugar ser atribuído, direta микроскопирование e a semeadura de uma nutricional quarta-feira. A população de micro-organismos e grupos que habitam o solo, variam em таксономическому o estado e as funções. Em ciência, eles estão agrupados sob o termo genérico de "почвенная a biota". Cartilha – habitat de grande número de microrganismos. Em um grama de solo presente de 1 até 10 bilhões de suas células. Neste ambiente ativo flui a decomposição de matéria orgânica, com a participação de diversas сапрофитных de microorganismos. métodos sanitária e microbiológica da exploração da água e do solo

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Microscópico método microbiológica da pesquisa: fases

A Análise do ambiente começa com a seleção de amostras. Para isso, usam pré-purificado e протертый álcool faca (você pode usar uma pá). Depois disso, é feita a preparação da amostra. A fase seguinte – contagem de células coradas esfregaços. Falaremos sobre cada fase separadamente.

A Seleção de amostras

Ao analisar arável do solo, geralmente de amostras colhidas com uma profundidade de apenas uma camada. Primeiro é removido de 2-3 cm do topo do solo, pois ela pode estar presente irrelevantes microflora. Depois disso, a área estudada solo cobram monólitos. O comprimento de cada um deles deve corresponder à espessura da camada, a partir da qual você precisa para tomar o exemplo.

O setor de 100-200 кв. m retirado 7-10 amostragem. O peso de cada – a ordem de 0.5 кг. amostragem devem ser cuidadosamente no saco. Depois disso, cobram em média de uma amostra, pesando aproximadamente 1 кг. deverá colocá-la пергаментный (estéril) pacote aninhado dentro de um saco de tecido. Até a análise direta da amostra é armazenada na geladeira.

Preparação para o estudo

Перемешанная o solo se lança a seca de vidro. Pré-lo, você deve limpar com álcool e queimar sobre o queimador. Com a ajuda de uma espátula o solo cuidadosamente misturado e torna-se uma camada lisa. Obrigatoriamente, tem de remover raízes dos nervos, outros elementos estranhos. Para isso, use uma pinça. Antes de pinça e espátula acendeu sobre o queimador e остужают.

A Partir das diferentes áreas do solo, distribuídas em vidro, são selecionados pequenas porções. Eles pesam na xícara de porcelana técnicos balança. Obrigatório o estágio microscópico O método de pesquisa microbiológica é um tratamento especial da amostra. Com antecedência a necessidade de preparar 2 estéreis do bulbo. A sua capacidade não deve exceder 250 мл. Em uma das kolb deita 100 ml de água da torneira. Dela tomam 0.4-0.8 ml de líquido e hidratar re-suspensão de solo até пастообразного estado. A mistura deve moer o dedo ou borracha pilão, no prazo de 5 мин. métodos sanitária e microbiológica estudo do solo

Com a Água da primeira lâmpada почвенную massa movem no vazio do frasco. Avançar novamente terreno. Depois disso, a massa é transferida para o balão perto de chama do queimador. Capacidade de armazenamento com o solo chorume abalado em balanço ao longo de 5 мин. Depois disso, deixam отстаиваться cerca de 30 с. É necessário para que as partículas maiores se estabeleceram. Através de um minuto e meio de massa usam para preparar a droga.

A Contagem de células fixo esfregaços

Microscópico Direto estudo do solo é realizada por O método de pesquisa microbiológica, desenvolvido Виноградским. Em um determinado volume de suspensão preparada calcula o número de células de microrganismos. O estudo de traços fixos permite guardar medicamentos em longo prazo e realizar contagens de a qualquer momento.

Preparação de um medicamento implementadosda seguinte forma. Um determinado volume de suspensão (geralmente 0.02-0.05 ml) aplicado utilizando микропипетки em uma lâmina de vidro. Para ele, acrescentam uma gota de solução de agar-ágar (mistura de polissacarídeos агаропектина e do agarose, extraídos de marrons e vermelhos de algas do mar Negro), rapidamente agitou-se e distribuem-na praça 4-6 кв. см. uma Mancha seca ao ar e fixa 20-30 мин. álcool (96 %). Mais droga hidratar com água destilada, colocados em p-p карболового эритрозина 20-30 мин.

Após a coloração de sua lavadas e secas ao ar. A contagem de células é realizado com иммерсионным de uma lente. métodos sanitária e microbiológica de pesquisa de água

Semeadura em densas do ambiente

Microscópicas Métodos microbiológicos de pesquisa, permitem identificar um grande número de microrganismos. Mas, apesar disso, o método de plantio é considerado o mais comum na prática. Sua essência consiste em высеве quantidade de droga (solo suspensão) em placa de Petri uma quarta-feira.

Este O método microbiológica de pesquisa permite considerar não apenas a quantidade, mas também de diretiva de grupo e, em alguns casos, e a estrutura específica microscópico da flora. Contagem do número de colônias é feita, geralmente, a partir do fundo da placa de Petri de oxigênio. No подсчитанном um terreno é colocado um ponto de marcador ou de tinta.

Análise de água

A Microflora de água de um objeto, normalmente, reflete a composição microbiana do solo em torno dele. Neste contexto, o Métodos sanitária e microbiológica da exploração da água e do solo Têm especial valor prático ao estudo de estado de um determinado ecossistema. Em corpos de água doce contêm, geralmente, кокки, палочковидные bactérias.

Анаэробы na água são detectados em pequenas quantidades. Geralmente, eles se reproduzem no fundo de corpos d'água, em île, participando em processos de purificação. A microflora dos oceanos e mares representada principalmente солелюбивыми (галофильными) por bactérias.

Na água de poço artesiano poços de microrganismos praticamente não há. Isso resulta de mídia a capacidade do solo de camadas.

Geralmente Aceites Métodos microbiológicos de pesquisa de água São considerados definição microbiana do número e coley-título ou coley-índice. O primeiro indicador mostra o número de bactérias em 1 ml de líquido. Se o índice é um número intestinais palitos, presentes em um litro de água, e se o título – o número mínimo ou máximo para a retirada do líquido, em que ainda é possível detectar.

A Definição microbiana número

Este método sanitária e microbiológica de pesquisa de água é a seguinte. Em 1 ml de água determinam o número de opcionais анаэробов e мезофильных (intermediário) positivos aeróbios, capazes de мясопептонном агаре (principal nutriente do ambiente) a 37 graus. ao longo de um dia formar uma colônia visível quando um aumento no 2-5 р. ou a olho nu. ordem de unificação de métodos microbiológicos de pesquisa

A Chave para o estágio em questão O método de pesquisa microbiológica da água é a semeadura. A partir de cada experimentação é feito o plantio de pelo menos de 2 diferentes quantidades. Ao analisar a água da torneira em cada copo uma contribuição de 1-0.1 ml de um líquido puro e de 0.01 a 0.001 ml contaminada. Para o plantio de 0.1 ml ou menor quantidade de líquido se divorcia de água destilada (estéril) de água. Consistentemente preparam десятикратные de reprodução. De 1 ml de cada uma delas fazem, em duas placa de Petri.

Reprodução derramado nutritivo агаром. A sua necessidade de pré-derreter e resfriá-lo até 45 graus. Após forte agitação quarta-feira deixam na superfície horizontal de ponto de fluidez. A 37 graus. as lavouras são cultivadas ao longo do dia. Em questão O método de pesquisa microbiológica da água permite ter em conta os resultados para os copos, onde a contagem de colônias na faixa de 30 a 300 segundos.

Ar

Ele é considerado de trânsito do ambiente para os microorganismos. Os principais Métodos de pesquisa microbiológica do ar são седиментация (afundamento) e aspiração.

A Microflora ar ambiente é convencionalmente dividido em uma variável e uma constante. A primeira referem-se a levedura, пигментообразующие кокки, спороносные bacilos, bastonetes e outros micro-organismos resistentes ao ressecamento, expostos à luz. Representantes da variável microflora, entrando no ar a partir de familiar para eles habitat, de curta duração mantêm a sua vitalidade.

No ar de grandes metrópoles dos microrganismos é muito maior que no ar ambiente rural. Sobre os mares, as florestas de bactérias é muito pouco. Purificação do ar contribuem para a precipitação: a neve e a chuva. Em espaços fechados germes muito mais, do que em espaços abertos. O seu número aumenta durante o inverno, quando a ausência regular de ventilação. métodos sanitária e microbiológica da pesquisa

Седиментация

Este O método microbiológica de pesquisa em microbiologia é considerado o mais simples. Ele se baseia em оседании gotas e partículas na superfície do ágar em aberto placa de Petri sob a ação da força da gravidade. O método de sedimentação, não permite determinar com precisão o número de bactérias no ar. O fato é que, no exterior, uma xícara de travar pequenas frações de partículas de poeira e bactérias gotas muito difícil. Na superfície são atrasadas principalmente as partículas maiores.

Este método nãoutilizado na análise de qualidade do ar. Nesse ambiente peculiar, grandes variações de velocidade de movimento do fluxo de ar. Седиментация, no entanto, pode ser usado quando não houver mais perfeitos instrumentos ou fonte de energia.

A Definição microbiana dos números é feita pelo método de Омелянского. De acordo com ele, cerca de 5 minutos na superfície do ágar com 100 кв. ver se instala é o número de bactérias, que está presente em 10 l de ar.

A Ordem 535 "Sobre a harmonização de métodos microbiológicos de pesquisa"

Бактериологический análise ocupa um importante lugar no complexo clínico-laboratoriais actividades destinadas a diagnóstico, prevenção e tratamento de diversas doenças infecciosas. No entanto, o estudo do meio ambiente, eles não estão limitados.

De Particular importância é a бактериологический análise de material biológico em hospitais. A pesquisa, realizadas em hospitais, têm exigências mais elevadas. O objetivo da Ordem "Sobre a harmonização de métodos microbiológicos de pesquisa" é a melhoria do bacteriológicas análise, melhoria da qualidade e da eficiência microbiológica de diagnóstico. микробиологический método de pesquisa em microbiologia

Exame Microscópico de amostras de mulheres

é a chave para o método de análise quando o diagnóstico de infecções sexualmente transmissíveis e infecções oportunistas (chamadas genericamente-patogênicas de bactérias).

A análise Microscópica permite avaliar qualitativa e quantitativa da composição da microflora, verificar a regularidade da coleta da amostra. Por exemplo, a presença de epitélio vaginal no esfregaço, retirado de um cervical do canal, aponta para a violação de regras de seleção biológica da experimentação.

Vale a pena dizer que o exame microbiológico para laboratório neste caso, geralmente acompanhada de alguns problemas. Eles estão relacionados com o fato de que na parte inferior de departamentos sexual trato na presente norma diversa microflora, variando em idade diferentes períodos. Para melhorar a eficiência da pesquisa e que foram desenvolvidos estandardizados regras.

Diagnóstico de infecções virais

Ela é realizada por métodos de detecção do ARN e DNA paulo. Eles baseiam-se principalmente na determinação de seqüências de nucleotídeo no patológica material. Para isso, são utilizadas sondas moleculares. Eles representam artificialmente obtido ácidos nucleicos, complementares (complementares) viral ácidos, меченные radioativa marcados ou биотином.

Característica do método é repetidamente copiar um determinado fragmento de DNA, que inclui várias centenas (ou dezenas) nucleotídeo pares. O mecanismo de replicação (cópia de segurança) é que o jogo de reconstrução pode começar exclusivamente em determinados blocos. Para a sua criação são utilizados primers (priming). Eles representam sintetizadas oligonucleotides.

PCR-diagnóstico (reação em cadeia da polimerase) é de fácil execução. Este método permite obter rapidamente o resultado se você usar uma pequena quantidade de material patológico. PCR-diagnóstico revela aguda, crônica e latente (oculto) de infecção.

Quando a sensibilidade este método é considerado o mais preferido. No entanto, atualmente, o teste de sistema não é confiável, por isso PCR diagnóstico não pode substituir completamente as metodologias tradicionais.


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